SmallRNA测序
服务简介
SmallRNA测序技术则是借助第二代高通量测序技术,对某物种某组织在特定状态下的18-30 nt(或18-40 nt)的small RNA进行高通量测序。继而通过数据库比对,对获得的small RNA序列进行分析、鉴定,将数百万条small RNA序列分类成rRNA、tRNA、snRNA、snoRNA和miRNA等。另外,还可以通过miRNA前体的标志性发夹结构,预测新的miRNA,并对鉴定出的相应已知miRNA和新miRNA进行靶基因预测。通过对miRNA靶基因的相关分析,如GO分析和pathway 分析,可将鉴定出的miRNA与相应表型差异关联起来,从而为解释相关生理过程的调控机制提供证据。
技术流程
Cold Spring Harb Protoc. 2015 Apr 13;2015(11):951-69. doi: 10.1101/pdb.top084970
服务优势
- 云蜂生物提供从样品提取、建库测序到数据分析解读的一站式解决方案;
- 除了交付高质量的测序数据和各种常规性分析结果,我们从待解决的科学问题出发,对数据做深入的分析和挖掘,寻求科学问题的答案;
- 我们的分析报告包含发表质量的图表和详尽的结果描述,协助您快速完成文章撰写;
- 从项目方案设计开始,我们的项目负责人(三年以上基因组学研究经验)就全程负责项目执行,直到文章最终投稿发表;
服务流程与内容
- 项目设计方案优化:在项目前期,根据您的研究目的以经费预算,我们提供项目设计的优化和改进方案;
- 样品准备:我们可以接收多种不用类型的样本(包括血样,组织、唾液、血液以及FFPE样品),避免您花费大量精力准备合格的RNA样本;
- 样品提取与文库构建:使用QIAGEN公司的RNA提取试剂盒提取高质量的RNA,并对检测合格的RNA进行文库构建;
- 高通量测序:用Illumina公司最新的HiSeq 4000或者X10平台完成高通量测序, Single-end测序,reads读长50bp;
- 数据分析与解读:利用经过验证的标准化流程完成基本数据分析,并由专业的项目负责人(三年以上基因组研究经验)和您制定个性化分析计划,完成个性化分析任务;
- 提交分析结果和报告:完成数据分析后,提交原始测序数据、完整的数据分析结果和专业易懂的数据分析报告。
分析内容
对于小RNA测序,我们提供以下分析
- 小RNA的分类与注释统计;
- 已知小RNA的表达谱构建;
- 预测新的小RNA并绘制二级结构;
- 样品间小RNA差异表达分析;
- 靶基因预测及注释;
- mir2disease数据库注释;
参考文献
[1]. Characterization of microRNAs in serum: a novel class of biomarkers for diagnosis of cancer and other diseases. Cell Res. 2008 Oct;18(10):997-1006. doi: 10.1038/cr.2008.282.
[2]. Identification and characterization of novel amphioxus microRNAs by Solexa sequencing. Genome Biol. 2009;10(7):R78. doi: 10.1186/gb-2009-10-7-r78. Epub 2009 Jul 17.
[3]. MicroRNA expression profiling during the life cycle of the silkworm (Bombyx mori). BMC Genomics. 2009 Sep 28;10:455. doi: 10.1186/1471-2164-10-455.
[4]. MicroRNAs of Bombyx mori identified by Solexa sequencing. BMC Genomics. 2010 Mar 3;11:148. doi: 10.1186/1471-2164-11-148.
[5]. Genome-wide identification and analysis of drought-responsive genes and microRNAs in tobacco. Int J Mol Sci. 2015 Mar 12;16(3):5714-40. doi: 10.3390/ijms16035714.