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ChIP-seq

服务简介

染色质免疫共沉淀(Chromatin Immunoprecipitation,ChIP)是目前唯一研究体内DNA与蛋白质相互作用的技术。其原理是通过染色质免疫共沉淀技术富集活细胞状态下的蛋白-DNA复合物,特异性的富集与目的蛋白结合的DNA片段,通过对这些DNA片段的检测来获取蛋白质与DNA相互作用的信息。ChIP-seq结合了高通量测序与ChIP富集技术,可在全基因组范围内对蛋白与DNA的相互作用进行高效的分析,具有成本低、效率高、检测灵敏以及覆盖度高等优势。ChIP-seq研究的目的蛋白主要有组蛋白修饰以及转录因子等。

技术流程

ChIP-seq技术流程
Nat Protoc. 2010 Mar;5(3):457-72. doi: 10.1038/nprot.2009.244.

服务优势

  • 云蜂生物提供从样品提取、建库测序到数据分析解读的一站式解决方案;
  • 除了交付高质量的测序数据和各种常规性分析结果,我们从待解决的科学问题出发,对数据做深入的分析和挖掘,寻求科学问题的答案;
  • 我们的分析报告包含发表质量的图表和详尽的结果描述,协助您快速完成文章撰写;
  • 从项目方案设计开始,我们的项目负责人(三年以上基因组学研究经验)就全程负责项目执行,直到文章最终投稿发表;

服务流程与内容

  • 项目设计方案优化:在项目前期,根据您的研究目的以经费预算,我们提供项目设计的优化和改进方案;
  • 样品准备:我们可以接收多种不用类型的样本(包括富集的DNA、组织、培养细胞等类型样品),避免您花费大量精力准备合格的样本;
  • 样品提取与文库构建:使用Illumina公司的建库试剂盒对检测合格的DNA进行文库构建;
  • 高通量测序:用Illumina公司最新的HiSeq 4000或者X10平台完成高通量测序, Single-end测序,reads读长50bp;
  • 数据分析与解读:利用经过验证的标准化流程完成基本数据分析,并由专业的项目负责人(三年以上基因组研究经验)和您制定个性化分析计划,完成个性化分析任务;
  • 提交分析结果和报告:完成数据分析后,提交原始测序数据、完整的数据分析结果和专业易懂的数据分析报告。

分析内容

对于ChIP-seq,我们提供以下分析

  1. 数据过滤质控;
  2. ChIP 测序序列与参考基因组序列的比对;
  3. Peak 分析;
  4. Peak注释;
  5. 鉴定样品间差异Peak;
  6. 样品间差异Peak注释。

参考文献

[1]. ChIP-seq and beyond: new and improved methodologies to detect and characterize protein-DNA interactions. Nat Rev Genet. 2012 Dec;13(12):840-52. doi: 10.1038/nrg3306. Epub 2012 Oct 23.

[2]. Role of ChIP-seq in the discovery of transcription factor binding sites, differential gene regulation mechanism, epigenetic marks and beyond.Cell Cycle. 2014;13(18):2847-52. doi: 10.4161/15384101.2014.949201.